A poli-ADP-riboziláció szerepe a dohányfüst által kiváltott sejthalál szabályozásában

A dohányzás számos betegség pl. a tüdőrák, szív- és érrendszeri betegségek, asztma kialakulásához hozzájárulhat. A cigarettában több ezer vegyület található, köztük jó néhány szabadgyök is, melyek a DNS károsodásához vezetnek, és ezáltal aktiválják a poli(ADP-ribóz) polimeráz-1 (PARP-1) enzimet. A poli-ADP-ribozilációnak (PARilációnak) szerepe van a DNS javításában és a sejt túlélésében, de a túlzott PARiláció nekroptotikus sejthalált okozhat. A PAR polimerek degradálásában a poli(ADP-ribóz) glikohidroláz (PARG) vesz részt. Munkánk során a cigarettafüst kivonat (Cigarette Smoke Extract, CSE) hatását vizsgáltuk A549 tüdő epitélsejteken. A CSE kezelés PARilációt indukált, amit a polimer Western blottal történő kimutatásával igazoltunk. Az MTT redukción alapuló sejtéletképesség méréseink szerint a CSE a sejtek életképességét idő- és koncentrációfüggő módon csökkentette. A CSE önmagában is tartalmaz hidrogén-peroxidot és szuperoxidot, de CSE kezelés hatására intracellulárisan ezen gyökök szintje tovább emelkedik, amit Ampliflu Red és mitoSOX festékekkel mértünk. A PARiláció szerepének tisztázására a CSE által kiváltott oxidatív stressz során PARP-1 és PARG csendesített (shPARP, shPARG) sejtvonalakat használtunk. A csendesítés sikerességét qPCR és Western blot kísérletekkel igazoltuk. Mind a PARP, mind a PARG csendesített sejtek esetén fokozott sejtpusztulást mértünk a kontroll sejtekhez képest. Elmondható, hogy a CSE kezelés intracelluláris ROS keletkezést és DNS károsodást okozott, és a sejtek túlélésében a PARilációnak és a PARP-1 enzimnek jelentős szerepe lehet.