CB1 receptor és endogén kannabinoidokat szintetizáló enzimek expressziója gerincvelői asztrocitákon

Az endokannabiniod-mediált szignalizációs mechanizmusok fontos szerepet játszanak a neuronok és gliasejtek közötti kétirányú kommunikáció megvalósításában. A neuronok által felszabadított endogén kannabinoidok ugyanis aktiválhatják az asztrocitákon található kannabinoid-1 receptorokat(CB1-R), amelyeknek következtében a gliasejtek a neuronok működését befolyásoló glutamátot szabadítanak fel. Ismeretes ugyanakkor, hogy a két legfontosabb, endogén kannabinoid szintézisben szerepet játszó enzim, a diacilglicerol-lipáz alfa (DGL-α) és az N-acil-foszfatidil-etanolamin specifikus foszfolipáz D (NAPE-PLD) is megtalálható asztrocitákban, azaz feltételezhető, hogy az asztrociták nem csupán aktiválhatók kannabinoid ligandokkal, hanem endogén kannabinoidok felszabadítására is képesek. Kísérleteinkkel arra kerestük a választ, hogy a DGL-α és NAPE-PLD enzimek aktivációja, és ezen keresztül endogén kannabinoid szintézis indukciója megvalósulhat-e CB1-R aktiválásán keresztül.
A CB1-R és a kannabinoid szintetizáló enzimek együttes megjelenését többszörös immunhisztokémiai jelölések segítségével vizsgáltuk a gerincvelő felületes hátsó szarvában. Úgy találtuk, hogy az asztrocita nyúlványok döntő többsége mind CB1-R, mind DGL-α-t vagy NAPE-PLD-t is expresszál úgy, hogy míg a NAPE-PLD megoszlása homogénnek bizonyult a CB1-R környezetében, addig a DGL-α immunreaktivitás denzitása a CB1-R-tól 5-6 μm távolságban sűrűsödést mutatott. Ez a megoszlás megfelelő morfológiai alapot teremt ahhoz, hogy CB-R aktivációját követően kialakuló Ca tranziens aktiválja a DGL-α-t és NAPE-PLD-t.
A gliális endokannabinoid rendszer funkcionális vizsgálatának előkészítése érdekében primer asztrocita tenyészeteket hoztunk létre, és immunfluoreszcens jelölések segítségével vizsgáltuk, vajon in vitro körülmények között is expresszálják-e a gerincvelői asztrociták a CB1 receptort és a két kannabinoid szintetizáló enzimet. Eredményeink alapján a tenyésztett gerincvelő asztrocitáknak több, mint a fele expresszál a CB1 receptor mellett DGL-α-t vagy NAPE-PLD-t, tehát a primer asztrocita kultúra megfelelő in vitro modellt jelent az asztrociták kannabinoid szignalizációjának a további vizsgálatához.