Vad típusú és diszpáz indukálta PVR vizsgálata kétdimenziós gélelektroforézis és tömegspektrometriás fehérje analízis segítségével egér üvegtesti mintákból

A proliferatív vitreoretinopátia (PVR) a szem ideghártyájának egy reaktív folyamata, mely létrejöhet retinaleválás, illetve sebészeti beavatkozás hatására. A PVR a retina egy fiziológiás javítási mechanizmusának olyan kóros állapota, mely nem kívánatos következményekkel jár. A PVR patomechanizmusa eddig nem teljesen tisztázott. Jelen kutatásunk egy nagyobb tanulmány része, amely során célul tűztük ki olyan fehérjék azonosítását a vad típusú kezeletlen és diszpáz indukálta PVR üvegtesti mintákból, amelyek jellemzőek a PVR megjelenésére. Ez lehetővé tenné, hogy közelebb kerüljünk a betegség kialakulásának megismeréséhez, továbbá hogy potenciális targeteket azonosítsunk a jövőbeni terápiák számára.
A PVR vizsgálatára Petrovski G. és munkatársai egy egérmodellt hoztak létre oly módon, hogy az egerek szemében diszpáz oldat befecskendezésével előidézték az elváltozást. Ezen egérszemekből izolálták a vitreális folyadékot, amelyet proteomikai vizsgálatokhoz használtunk fel.
Munkánk során a minták fehérjéit kétdimenziós gélelektroforézis segítségével elválasztottuk izoelektromos pontjuk és méretük alapján. Ezt követően a fehérje foltokat láthatóvá tettük RuBPS festék segítségével, majd a gélképeket beszkenneltük. A Delta 2D szoftver segítségével elvégeztük a két csoport (kontroll és diszpáz indukálta PVR) expressziós mintázatának vizsgálatát és kiválasztottuk az expressziós különbséget mutató foltokat. Az eredményeinket összehasonlítottuk a korábbi transzglutamináz 2 “knock out” (TG2KO kontroll) és diszpáz indukálta TG2KO PVR csoport vizsgálata során kapott ereményeinkkel.