A szívizom szarkomer óriásfehérjéje a titin, melynek oxidatív módosulásai szerepet játszhatnak az újszülöttkori diasztolés diszfunkció patogenezisében. A perinatális adaptáció során a merev N2B titin izoforma expressziója nő a rugalmas N2BA izoformával szemben, mely a szívizomsejtek passzív erejét (Fpasszív) növeli. Célunk az Fpasszív és a fehérje oxidáció újszülöttekben feltételezett összefüggésének vizsgálata volt.
Kísérleteink során 0, 7, 21 napos és felnőtt patkányok mechanikailag izolált és permeabilizált bal kamrai szívizomsejtjein mértük az Fpasszív értékeit. Az oxidoreduktív hatások feltárása 10 mM DTDP (2,2’-ditio-dipiridin), szulfhidril (SH)-csoport oxidáns és DTT (ditiotreitol), redukálószer alkalmazásával in vitro történt. A titin izoformák SH-csoport oxidációjának vizsgálatát Western blot technikával, arányuk meghatározását SDS-gélelektroforézissel és proteinfestéssel végeztük.
Az Fpasszív a 0 és 7 napos patkányok bal kamrai szívizomsejtjeiben alacsonyabb volt a 21 napos és felnőtt patkányokban mért értékekhez viszonyítva (rendre: 0,11±0,01 kN/m2 vs. 0,26±0,02 kN/m2 vs. 0,56±0,02 kN/m2 vs. 2,11±0,08 kN/m2 SL: 2,3 µm, P<0,05, n=6-13). Az N2BA/N2B arányok megoszlása szintén életkorfüggő volt (rendre: 79,50±0,65/20,50±0,65%, 41,10±0,85/58,9±0,85%, 10,10±0,69/89,9±0,69% és 5,44±0,35/94,56±0,35% a 0, 7, 21 napos és felnőtt állatokban, n=3-7). DTDP hatására 0 és 7 napos patkányokban az Fpasszív jelentősen, a 21 napos és felnőtt állatokban azonban kevésbé emelkedett (normalizált ΔFpasszív, rendre: 99,29±26,02% vs. 64,89±23,2% vs. 38,57±20,9% vs. 18±7% SL: 2,3 µm, P<0,05, n=6-8). Az Fpasszív emelkedését a DTT minden csoportban visszafordította. A kezelést követő relatív oxidált SH-tartalom az N2BA izoformában: 80±1%, 71±1%, 64±1% volt a 0, 7 és 21 napos patkányokban (P<0,05, n=4-20, a felnőtt patkányokban nem volt detektálható), az N2B izoformában: 74±1%, 62±2%, 53±2%, 32±2% volt a 0, 7, 21 napos és felnőtt csoportokban (P<0,05, n=4-20).
Újszülött patkány szívizomsejtekben a kor előrehaladtával az Fpasszív oxidatív érzékenysége csökken, melynek hátterében az N2BA és N2B titin izoformák szerkezeti érése állhat.