A miozin foszfatáz szerepének vizsgálata a sebzáródásban.

Printer-friendly versionPrinter-friendly version
Conference: 
2014/2015. tanév
Session: 
Molecular biology
Presenting author
Name (format for foreign students: Last Name, First Name): 
Szabó Evelin

Abstract data

Előadás címe: 
A miozin foszfatáz szerepének vizsgálata a sebzáródásban.
Abstract: 

A seb a test kültakaróján mechanikus okból esett folytonossági hiány, melynek gyógyulása sejtes események kaszkádja. A sebgyógyulás folyamata négy átfedő fázisból áll: a hemosztázis alatt a vérlemezkék vérrögöket képeznek, a gyulladási fázisban az immunsejtek eltávolítják a károsodott szövetet és elpusztítják a behatoló kórokozókat, míg a proliferációs fázisban a seb összehúzódásával kialakul a sarjszövet, végül a maturációs fázisban a kollagének által kialakított keresztkötések megnövelik a sebhely szakítószilárdságát. A sebzáródás molekuláris mechanizmusa még teljesen nem tisztázott, de hipotézisünk szerint a citoszkeletális elemek reverzibilis foszforilációja általi dinamikus változás szabályozása fontos jelentősséggel bír. A folyamatot a protein kináz és foszfatáz enzimek összehangolt működése eredményezi. Ezek közül is kiemelkedő a Rho A aktivált kináz (ROK) és a miozin foszfatáz (MP). A MP egy katalitikus alegységből (PP1c) és egy miozin-kötő regulátor alegységből áll (MYPT), a miozin és más kontraktilis fehérjék defoszforilációjával az összehúzódást és sejtmigrációt szabályozza. Célunk az volt, hogy leírjuk a ROK/MP enzimpár lehetséges szerepét a sebzáródásban humán keratinocita és egérbőr modellt használva. A MYPT és PP1c alegységeket kimutattuk Western blot analízissel és immunfluoreszcenciával HaCat sejtekben és bőrszövetben is. A MP-t tautomycinnel (TM), a ROK-t pedig H1152-vel gátolva a HaCat sejtek életképességében nem tapasztaltunk szignifikáns változást. A TM alkalmazása 45 %-kal csökkentette a protein foszfatáz aktivitást P32-miozin könnyű lánc szubsztrátot alkalmazva. A MP által okozott specifikus változások igazolására a MYPT alegység csendesítését végeztük el, aminek hatására a protein foszfatáz aktivitás 31%-ban gátlódott. Scratch assay-t végezve a ROK gátlása felgyorsította, míg a MP gátlása blokkolta a HaCat sejtek migrációját. BALB/c egerek háti sebeinek 6 napos kezelése során a TM kezelés 19%-kal nagyobb, míg a H1152 kezelést 27%-kal kisebb sebfelszínt eredményezett a kontrollhoz képest. Eredményeink arra utalnak, hogy a MP elősegíti, míg a ROK gátolja a sebgyógyulás folyamatát a fehérjék foszforilációs folyamatainak szabályozása által.

First tutor
Name: 
Dr. Lontay Beáta
Department: 
Orvosi Vegytani Intézet

Támogatók: Támogatók: Az NTP-TDK-14-0007 számú, A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése helyi konferencia keretében, az NTP-TDK-14-0006 számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása, NTP-HHTDK-15-0011-es A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése 2016. évi helyi konferencia keretében, valamint a NTP-HHTDK-15-0057-es számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása című pályázatokhoz kapcsolódóan az Emberi Erőforrás Támogatáskezelő, az Emberi Erőforrások Minisztériuma, az Oktatáskutató és Fejlesztő Intézet és a Nemzeti Tehetség Program