Szénéhező Aspergillus nidulans tenyészetek glutation anyagcseréje

Printer-friendly versionPrinter-friendly version
Conference: 
2010/2011. tanév
Session: 
Biokémia, Mikrobiológia, Immunológia
Presenting author
Name (format for foreign students: Last Name, First Name): 
Spitzmüller Zsolt

Abstract data

Előadás címe: 
Szénéhező Aspergillus nidulans tenyészetek glutation anyagcseréje
Abstract: 

A glutation (GSH) az egyik legelterjedtebb kis molekulatömegű tiol az élővilágban. Számos élettani folyamatban meghatározó szerepet játszik; több gomba esetében igazolták esszenciális voltát is. Az Aspergillus nidulans szénéhezés hatására elveszíti GSH tartalmának mintegy 90 %-át. Vizsgálataink célja a GSH tartalom csökkenésért felelős folyamatok azonosítása és e jelenség fiziológiai hátterének megértése volt.
DNS microarray adatok elemzése alapján a GSH anyagcserében érintett gének közül kettő indukálódott szénéhezés hatására. Mindkét gén gamma-glutamil-transzpeptidáz (gammaGT) domainnal rendelkezik, így részt vehet a GSH lebontásában. qRT-PCR-es vizsgálataink megerősítették a két gén indukcióját és enzimaktivitás méréssel is sikerült a gammaGT aktivitások növekedését kimutatnunk. A gammaGT aktivitás intracellulárisan és extracellulárisan is jelen volt a tenyészetekben. Az intracelluláris gammaGT aktivitások növekedését glükóz hiányában a szerves nitrogénforrások elősegítették MeaB-függő módon. Az extracelluláris gammaGT aktivitások indukálódásához a glükóz hiányon túl a FluG-BrlA útvonal működésére volt szükség. A fermentlébe szekretálódó fehérjék közül zimogram analízissel sikerült egy gammaGT aktivitást mutató sávot azonosítanunk, melyet - MALDI-TOF vizsgálat alapján - egy glutamináz A gén kódolt. Irodalmi adatokból tudjuk, hogy az Aspergillus oryzae glutamináz A-ja szintén mutat gammaGT aktivitást. qRT-PCR-es vizsgálatokkal igazoltuk, hogy a glutamináz A gén indukciójához szénéhezésre és működőképes FluG-BrlA jelátviteli útvonalra van szükség.
Az extracelluláris gammaGT aktivitást mutató enzim képződése felveti annak lehetőségét, hogy a GSH tartalom csökkenése mögött a GSH, esetleg az oxidálódott GSH extracelluláris transzportja állhat. A gammaGT indukció és a GSH tartalom csökkenése megfigyelhető a Candida albicans sejtek fonalképzésekor, valamint a Penicillium chrysogenum és Acremonium chrysogenum antibiotikum termelésekor is. Egyes Aspergillus fajok glutamináz A termelése ugyanakkor élelmiszeripari jelentőséggel bír. Eredményeink – hosszabb távon - elősegíthetik a fenti folyamatok pontosabb megismerését és gyakorlati célú manipulálásának kidolgozását.

First tutor
Name: 
Emri Tamás
Department: 
Debreceni Egyetem, TEK, Mikrobiális Biotechnológiai és Sejtbiológiai Tanszék
Second tutor
Name: 
Tóth Viktória
Department: 
Debreceni Egyetem, TEK, Mikrobiális Biotechnológiai és Sejtbiológiai Tanszék

Támogatók: Támogatók: Az NTP-TDK-14-0007 számú, A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése helyi konferencia keretében, az NTP-TDK-14-0006 számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása, NTP-HHTDK-15-0011-es A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése 2016. évi helyi konferencia keretében, valamint a NTP-HHTDK-15-0057-es számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása című pályázatokhoz kapcsolódóan az Emberi Erőforrás Támogatáskezelő, az Emberi Erőforrások Minisztériuma, az Oktatáskutató és Fejlesztő Intézet és a Nemzeti Tehetség Program