A hialuronsav és a hialuronsavreceptorok szerepe humán melanoma sejtvonalak migrációja során

A crista neuralis eredetű melanocytákból kialakuló melanoma malignum cutis-nak több, szövettanilag jól elkülöníthető stádiuma van. A sejtek kezdetben az epidermisben radier irányban terjednek, majd a membrana basalist áttörve megjelennek a dermisben. Irodalmi adatokból ismert, hogy a malignusan transzformált sejtek hialuronsav (HS) termelése megváltozik ezen folyamatok során. Az eddig ismert hialuronsav szintázok eltérő méretű HS-at termelhetnek, melyek más-más funkciót tölthetnek be egy malignusan transzformálódott sejt életében. A termelt HS részt vehet az extracelluláris mátrix organizációjában, vagy CD44 és RHAMM receptoron keresztül számos jelátviteli útvonalat befolyásolhat, melyek hatással lehetnek a sejtek migrációs képességeire.
Kísérleteink során egy erősen metasztatizáló tumor modelljének tekinthető humán melanoma sejtvonalat (HT168) használtunk. A sejtvonalban RT-PCR, Western blot és immuncitokémiai vizsgálatokkal igazoltuk a CD44 és RHAMM receptorok jelenlétét. A sejteket Boyden kamrában 3 óráig migráltattuk különböző méretű, 300-800 kDa és 1600 kDa tömegű HS-akat használva kemoattraktánsként. A kisebb méretű HS erőteljesebb migrációt indukált, mint a hosszabb poliszacharid jelenléte. Hasonló körülmények között a receptorok antitestjeit hozzáadva a kemoattraktánsokhoz vizsgáltuk a CD44 és RHAMM receptor érintettségét. Anti-RHAMM antitest és 1600 kDa tömegű HS jelenlétében a sejtek migrációja 50%-kal csökkent, míg a kisebb méretű HS keveréket tartalmazó kemoattraktánsban az antitest 80%-kal csökkentette a sejtek migrációs képességét. Az anti-CD44 antitest jelenlétében a migráció csökkenésének mértéke alacsonyabb volt mindkét méretű HS esetében, de a 300-800 kDa méretű HS jelenlétében is 70%-os migráció-visszaesést detektáltunk. A két receptor szimultán blokkolása további szignifikáns migráció csökkenést nem okozott.
Eredményeink arra utalnak, hogy a melanoma sejtek migrációjában mindkét HS-kötő receptor, a RHAMM és a CD44 is részt vesz, továbbá a kisebb méretű HS jelentősebb migráció fokozó hatással bír. További kísérleteinkben tervezzük az említett két receptor siRNS-sel való csendesítését és ennek vizsgálatát a melanoma sejtek migrációjára.