Növényi kannabinoidok hatása humán keratinociták biológiai folyamataira
Előadás adatai
Régóta ismert, hogy a Canabis sativa, a hallucinogén (-)-Δ9-tetrahidrokannabinol mellet több nem-pszichotróp fitokannabinoidot (FK) is termel, melyeknek számos jótékony élettani hatását dokumentálták már. Azonban kevés adat áll rendelkezésre a humán bőr immunológiai folyamatainak vonatkozásában. Jelen kísérleteink során ezért a célunk az volt, hogy megvizsgáljuk a legismertebb nem pszichotróp FK, a (-)-kannabidiol (CBD) gyulladásban betöltött szerepét immortalizált humán keratinocitákon; emellett, két újabb nem-pszichotróp, a szabadalmi védelem miatt „phCB1/2”-nek jelölt FK hatásának vizsgálatát is megkezdtük.
Első lépésként MTT-assay segítségével megállapítottuk, hogy sem a CBD, sem a phCB1 és 2 48 órás kezelések során 10µM-os koncentrációig szignifikánsan nem befolyásolták az immortalizált keratinociták (HPVK) életképességét, így kísérleteinkben az alkalmazott koncentrációkban hosszabb távon is alkalmazhatóak a keratinocitákkal szembeni toxicitás veszélye nélkül.
Munkacsoportunk korábbi kísérleteiben igazolta, hogy a CBD más bőr-eredetű sejttípusban (pl. szebocitában) gyulladásgátló hatást fejt ki. Így következő lépésben arra voltunk kíváncsiak, hogy a CBD gyulladásgátló hatása keratinocitákon is kialakul-e. Az „in vitro gyulladást” korábban optimalizált protokoll alapján UVB ionizáló sugárzással váltottuk ki. A keratinocita sejteket 312 nm-es hullámhosszúságú, 40mJ/cm2-es dózisú sugárzást követően a CBD különböző koncentrációival kezeltük. Azt tapasztaltuk, hogy az UVB sugárzás már 6 órával később jelentősen fokozta több ismert gyulladásos citokin (interleukin-1α, -6, -8, valamint a tumornekrózis faktor-α) mRNS szintű kifejeződését (RT-qPCR). Azonban a CBD-vel kezelt sejtek reverz dózisfüggést mutattak. A CBD 1µM-ban alkalmazva csökkentette, 10µM-ban növelte a gyulladásos citokinek mRNS szintű expresszióját. Az interleukin-1α, -6 és -8 citokinek kifejeződésében a CBD-hez hasonló dózisfüggő hatást kaptunk a phCB1 alkalmazása esetén is.
Eredményeink arra utalnak, hogy a CBD humán epidermális keratinociták esetén dózisfüggő hatást vált ki, mely felveti terápiás felhasználásának lehetőségét a különböző gyulladásos bőrbetegségek adjuváns terápiájában.
Támogatók: Támogatók: Az NTP-TDK-14-0007 számú, A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése helyi konferencia keretében, az NTP-TDK-14-0006 számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása, NTP-HHTDK-15-0011-es A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése 2016. évi helyi konferencia keretében, valamint a NTP-HHTDK-15-0057-es számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása című pályázatokhoz kapcsolódóan az Emberi Erőforrás Támogatáskezelő, az Emberi Erőforrások Minisztériuma, az Oktatáskutató és Fejlesztő Intézet és a Nemzeti Tehetség Program