.A Gaucher-kór egy lizoszómális tárolási betegség, amelyben a glükocerebrozidáz hiányának következtében az enzim szubsztrátja, a glükocerebrozid felhalmozódik a sejtekben. Mivel a tünetek súlyossága sem az enzimhiányt okozó mutációk típusaival, sem a reziduális enzimaktivitás mértékével nem mutat szoros összefüggést, valószínűsíthető, hogy a felhalmozódó szubsztráton kívül más tényezők is hozzájárulnak a tünetek kialakulásához. Vizsgálatainkban arra kerestük a választ, hogy a szubsztrát mennyiségének a plazmamembránban is detektálható növekedése megváltoztatja-e a membrán biofizikai tulajdonságait.
A Gaucher-kór modellezéséhez a THP-1 monocyta sejtvonalat használtuk, melyből PMA (phorbol-12-myristate-13-acetate) segítségével makrofágokat differenciáltattunk, és az enzimhiány létrehozására egy enziminhibotorral (CBE, konduritol-B-epoxid) kezeltük a sejteket. Fluoreszcens lipidanalógok vagy GFP-vel fuzionált membránfehérjék mobilitását FRAP (fluorescence recovery after photobleaching) módszerrel mértük. A sejtmembrán fluiditását TMA-DPH (trimetilammónium-difenilhexatrién) fluoreszcencia anizotrópiájának, míg a membrán hidratáltságát Laurdan generalizált polarizációjának mérésével határoztuk meg.
Eredményink szerint a Gaucher-kóros modell esetében mind az anizotrópia, mind a generalizált polarizáció szignifikánsan emelkedett, ami arra utal, hogy a membrán merevebbé és a vízmolekulák számára kevésbé hozzáférhetővé vált. A FRAP mérések szerint a fluoreszcens lipidanalóg diffúziója lassult, immobilis frakciója pedig 17%-ról 73%-ra nőtt. Míg a lipidtutajban található, GPI (glikozil-foszfatidil-inozitol) horgonyzott GFP esetén nem tapasztaltunk szignifikáns eltérést, addig a transzmembrán fehérjék viselkedését modellező ErbB2-GFP esetében a diffúziós állandó kb. ötödére csökkent a Gaucher kóros modell sejtekben.
Eredményeink arra utalnak, hogy Gaucher kórban a plazmamembrán rigidebbé válik, és a nem kizárólag lipidtutajban elhelyezkedő membránkomponensek mobilitása csökken. Megfigyeléseinket szeretnénk Gaucher-kóros emberek véréből izolált sejteken is ellenőrizni, amihez már sikerült emberi vérből izolált monocytákbol makrofágokat differenciáltatni.