Az agy tumoros elváltozásainak malignus, rossz prognózisú formája az astrocyta eredetű glioblastoma multiforme (GBM). A daganatos transzformáció során alacsony differenciáltságú sejttípusok, úgynevezett tumor őssejtek is kialakulnak. A tumor őssejtek képesek aszimmetrikus osztódással önmegújulásra, valamint differenciáltabb daganatos sejtek képzésére. A kialakuló heterogén tulajdonságú sejtpopuláció növeli a daganat agresszivitását és nehezíti a hatékony terápia kifejlesztését, valamint hozzájárul a tumor kiújulásához sebészeti eltávolítást követően.
Az A-vitamin származék all-trans retinsav (ATRA) a retinsav receptor (RAR), illetve a retinoid x receptor (RXR) által alkotott heterodimer aktiválásán keresztül hat. Szerepe a proliferációs folyamatokban, illetve a sejtdifferenciációban bizonyított. Emiatt az ATRA alkalmazása potenciális lehetőséget nyújt a daganat növekedésének gátlására és a tumor őssejtek visszaszorítására, ezáltal a tumor kiújulásának megelőzésére. Munkánk során célunk volt az ATRA proliferációra, illetve tumor őssejt kolónia kialakulásra gyakorolt hatásának vizsgálata, valamint a folyamatok hátterében álló potenciális szabályozó mechanizmusok feltérképezése GBM esetében.
Modellrendszerként U251 humán GBM sejtvonalat alkalmaztuk. Ebben a sejtvonalban megfigyeléseink szerint in vitro körülmények között kialakulnak tumor őssejt kolóniák. Az élő sejtek számának változását MTT reagens segítségével, a kolónia formációt pedig May-Grünwald Giemsa festést követően fénymikroszkóppal követtük nyomon. Az RAR:RXR által szabályozott gének meghatározásához transzkriptomikai (RNS-szekvenálás, RT-qPCR) és kromatin immunprecipitáción alapuló (ChIP-qPCR) vizsgálatokat végeztünk. A fehérjék kimutatása Western Blottal történt.
Eredményeink alapján az ATRA kezelés gátló hatással bír a GBM sejtek proliferációjára, illetve a tumor őssejt kolóniák kialakulására. A génexpressziós mérések során sikerült azonosítanunk olyan jelátviteli folyamatot, amely e fenotípusos különbségek hátterében állhat.
Eredményeink hozzájárulnak az ATRA kezelés hatékonyságának bizonyításához, mely a GBM ellenes klinikai terápia fontos tényezőjévé is válhat.